在一個波長,一個溶液的總吸光度是等于各個成分的吸光度的總和。根據(jù)這點就可分析混合物的各個組分。
如果有一種混合物,雖然是多組分,但組分吸收帶不相重迭。在某波長一種組分的吸收很大,而其它組分在此波長則無吸收。這樣就可在此波長采用上述的標準曲線法進行此組分的定量測定。
如果一個多組分混合物,其吸收帶雖然相互重迭,但能遵守比耳定律,則可以采用解聯(lián)立議程式的辦法來進行定量。如混合物中含有n個已知組分,則需在n個適當?shù)牟ㄩL進行n次組分各自在n個波長的摩爾吸光系數(shù)。波長的選擇應注意使一個組分的吸光系數(shù)比其它組分的吸光系數(shù)大,這樣才能得到較高的度。
如果混合物中的幾個組分吸收帶相互重迭的并且不遵守比耳定律,便不能用解聯(lián)立方程式的辦法來解析。此時用分光光度法定量比較困難。Fry采用校正法把混合樣品中的五個組分配成不同的溶液,得到一系列校正曲線。在校正曲線的基礎上,解析得到了五組分的含量。但方法十分繁瑣,使用不便。
如果混合物中含有未知吸收帶的組分就更困難了。此時先用化學法分離純化。但也可直接利用分光光度法來分析。Morton利用有雜質存在吸收光譜形狀的改變計算混合物中含有雜質時魚肝油的量。雖然利用分光光度法可以作多組分分析,但方法比較繁瑣。
近年來,很多分光光度計設有多組分分析附件。借助于微處理機來分析計算混合物中多種組分的含量,十分簡便、迅速、準確。使得分光光度法在混合的定量分析中發(fā)揮更大的作用。同樣,也可用后面介紹的導數(shù)光譜法來定量。